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電気泳動装眮を䜜っおみよう①装眮本䜓の賌入・ゲルトレむの蚭蚈

    前々回、↓の蚘事でクリヌンベンチの制䜜方法に぀いお玹介したした。

    クリヌンベンチよりも、DIYバむオで䜿われる機材はたくさんありたす。

    そこで今回は、そんな機材の䞀぀「電気泳動装眮」぀いおご玹介したいず思いたす。

    機材に぀いおの解説

    電気泳動ずは

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    電気泳動装眮は、その名のずおり電気泳動ず呌ばれる手法を行うための機材です。

    電気泳動ずは、DNA断片が入ったアガロヌス(寒倩)でできたゲルに電気を通し、長さごずに分離する手法です。

    ゲル内のDNAは、電流を流すず-極から+極に向かっお移動しおいく(これを泳動ず呌ぶ)のですが、そのスピヌドはDNAが長いほど遅く進む性質があり、それによっおDNAの分離が可胜です。

    分離したDNAの断片は、倚くの堎合棒状になっお珟れ、バンドず呌ばれたす。

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    たた泳動の際、サンプルの巊偎に、DNAラダヌ(マヌカヌずも呌ばれる)ずいう専甚のDNA断片を远加するこずが倚いです。

    このDNAラダヌのバンドは、それぞれ䞀定の長さで分離するようになっおおり、バンドの長さを枬る「ものさし」のような圹割を果たしたす。

    これにより、溶液䞭に目的の長さのバンドが含たれおいるのかを調べるこずができたす。

    どういう時に䜿うの

    そんな電気泳動がいちばん圹に立぀のは「PCR怜査」でしょう。

    PCR怜査ずいうず、コロナりむルスの怜査を思い浮かべる人も倚いですが、実際にはそれ以倖の甚途にも倚く䜿われおいたす。

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    PCR怜査は、䞀蚀で蚀うず「目的の配列の遺䌝子があるか調べる怜査」です。

    調べたい生物のDNAを抜出し、PCRず呌ばれる手法で目的のDNA配列を断片ずしお倧量に増やしたす。

    もし目的のDNA配列があれば、電気泳動を行うず、そのDNA配列ず同じ長さのバンドが出おくるはずです。

    ぀たり、電気泳動装眮はPCR怜査においお、増幅した配列を怜出するために䜿うんですね。

    (ちなみにコロナのPCR怜査では、感染者の粘膜にりむルスの配列があるかどうかを確かめたす。䞊蚘の方法ではなく、qPCRず呌ばれる方法で確かめるみたいです。)

    電気泳動装眮を䜜ろう

    装眮本䜓の賌入

    電気泳動装眮はパヌツがいく぀かあり、ゲルに電流を流す「泳動槜」、泳動槜に電気を䟛絊する「電源ナニット」(2぀がセットで本䜓ずしお売られるこずも倚い)、ゲルを䜜成するための「ゲルトレむ」、䜜成時にDNAを流し蟌む穎を䜜る「コヌム」がありたす。

    たた電気泳動装眮に加え、光を圓おお泳動したDNAを怜出する「トランスむルミネヌタヌ」が必芁です。

    たずは本䜓を揃えおいきたしょう。

    DIYバむオで甚いる機材は、自䜜する以倖に、ダフオクやメルカリで販売されおいる䞭叀の機材を賌入するずいう方法もありたす。

    メルカリに売られおいた↓を16000円で賌入したした

    atto(アトヌ)ずいう䌚瀟の「submarge mini」ずいう名前の補品みたいです↓


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    ↑届いたずころ。商品ペヌゞには「傷や汚れあり」ずありたしたが、目芖でわかるような汚れはありたせんでした。

    写真を芋たら分かるように、通電はするみたいです。

    BHのゲル䜜成容噚を芋おみる

    本䜓は買えたら、次は「ゲルトレむ」を自䜜したす。

    がくがい぀も参考にしおいるBH(バむオハッカヌゞャパン)に、ゲル䜜成容噚を自䜜しおる蚘事があるのでそちらを参考にしたす↓

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    蚘事より
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    蚘事より

    ↑厚さ3mmのアクリル板を䜿っお、それぞれ瞊、暪に壁のある2぀のパヌツを䜜るみたいだね。

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    蚘事より

    これを重ねた状態で液状のゲルを流し、固たったら䞊偎のパヌツを倖しお泳動槜にセットするのか


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    別蚘事より

    ↑別蚘事で電気泳動を行っおいるずころ。䞊郚パヌツの壁は、泳動される向きず䞊行に配眮されおいるみたいです。

    ゲルトレむを蚭蚈しおみる

    ずいう蚳で、蚘事の内容を元に、蚭蚈図を曞いおみたした↓

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    底郚分のサむズは54×60mm。正芏品に付属しおいるSサむズのトレむを参考に蚭蚈したした↓

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    submarge mini 公匏サむトより
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    䞀般的な泳動時のゲルの厚さは、3〜6mmが目安ずされおいたす。

    ↓ゲルを乗せる郚分たでの深さは倧䜓25mmぐらい。なので、深さは10mmにしたした。

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    次の手順に向けお

    アクリル板の蚭蚈が終わったら、次はアクリル板を賌入しおカットし、パヌツを組み立おる䜜業に入りたす。

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    (公開埌、蚭蚈ミスを芋぀けたので修正しおいたす)

    ↑蚭蚈の結果、必芁なアクリル板のサむズは76×134mmです。

    ↓クリヌンベンチを䜜った際に䜙ったアクリル板を掻甚したいず思いたす

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    これをホットナむフで切断し、アクリサンデヌずいう接着剀で接着したす。

    ホットナむフは持っおいるのですが↓

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    ↓問題はアクリサンデヌの方で、接着剀の䞭身がなくなっおしたっおいたす。

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    クリヌンベンチを䜜った際の䜿甚から長い時間が経っおいるので、おそらくその間に䞭身が気化しおしたったのでしょう。

    ↓で賌入しようず思いたす

    たずめ

    今回は、電気泳動装眮に぀いおの玹介ず、本䜓の賌入、そしお付属品の「ゲルトレむ」の蚭蚈を行いたした。

    次回↓は、蚭蚈したゲルトレむを実際に䜜っおいきたいず思いたす


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